טמפרטורת הגוף מראה שצריכת אנרגיה מפצה על הוצאת אנרגיה בעכברים זכרים במשקל תקין, אך לא בעכברים המושרים על ידי תזונה.

תודה שביקרתם באתר Nature.com. גרסת הדפדפן בה אתם משתמשים כוללת תמיכה מוגבלת ב-CSS. לחוויית המשתמש הטובה ביותר, אנו ממליצים להשתמש בדפדפן מעודכן (או להשבית את מצב התאימות ב-Internet Explorer). בינתיים, כדי להבטיח תמיכה מתמשכת, נציג את האתר ללא סגנונות ו-JavaScript.
רוב מחקרי המטבוליזם בעכברים מתבצעים בטמפרטורת החדר, אם כי בתנאים אלה, בניגוד לבני אדם, עכברים מוציאים הרבה אנרגיה לשמירה על טמפרטורה פנימית. כאן, אנו מתארים השמנת יתר הנגרמת על ידי תזונה (DIO) בעכברי C57BL/6J שקיבלו מזון צ'או צ'או או תזונה עשירה בשומן של 45%, בהתאמה. עכברים הושמו במשך 33 ימים בטמפרטורה של 22, 25, 27.5 ו-30 מעלות צלזיוס במערכת קלורימטריה עקיפה. אנו מראים כי צריכת האנרגיה עולה באופן ליניארי מ-30 מעלות צלזיוס ל-22 מעלות צלזיוס והיא גבוהה בכ-30% ב-22 מעלות צלזיוס בשני מודלי העכברים. בעכברים במשקל תקין, צריכת המזון נטרלה את צריכת האנרגיה (EE). לעומת זאת, עכברי DIO לא הפחיתו את צריכת המזון כאשר צריכת האנרגיה ירדה. לפיכך, בסוף המחקר, עכברים ב-30 מעלות צלזיוס היו בעלי משקל גוף גבוה יותר, מסת שומן וגליצרול וטריגליצרידים בפלזמה גבוהים יותר מאשר עכברים ב-22 מעלות צלזיוס. חוסר האיזון בעכברי DIO עשוי להיות תוצאה של דיאטה מוגברת המבוססת על הנאה.
עכבר הוא מודל החיה הנפוץ ביותר לחקר הפיזיולוגיה והפתופיזיולוגיה האנושית, ולעתים קרובות הוא בעל החיים המוגדר כברירת מחדל בשלבים המוקדמים של גילוי ופיתוח תרופות. עם זאת, עכברים נבדלים מבני אדם בכמה דרכים פיזיולוגיות חשובות, ובעוד שניתן להשתמש במידה מסוימת בקנה מידה אלומטרי כדי לתרגם אותו לבני אדם, ההבדלים העצומים בין עכברים לבני אדם טמונים בוויסות תרמו ובהומאוסטזיס של אנרגיה. זה מדגים חוסר עקביות מהותי. מסת הגוף הממוצעת של עכברים בוגרים קטנה לפחות פי אלף מזו של בוגרים (50 גרם לעומת 50 ק"ג), ויחס שטח הפנים למסה שונה בכפי 400 עקב הטרנספורמציה הגיאומטרית הלא לינארית שתוארה על ידי Mee. משוואה 2. כתוצאה מכך, עכברים מאבדים חום משמעותית יותר יחסית לנפח שלהם, ולכן הם רגישים יותר לטמפרטורה, נוטים יותר להיפותרמיה, ובעלי קצב חילוף חומרים בסיסי ממוצע גבוה פי עשרה מזה של בני אדם. בטמפרטורת חדר סטנדרטית (~22°C), עכברים חייבים להגדיל את הוצאות האנרגיה הכוללות שלהם (EE) בכ-30% כדי לשמור על טמפרטורת גוף הליבה. בטמפרטורות נמוכות יותר, EE עולה עוד יותר בכ-50% ו-100% ב-15 ו-7 מעלות צלזיוס בהשוואה ל-EE ב-22 מעלות צלזיוס. לפיכך, תנאי דיור סטנדרטיים גורמים לתגובת עקה קרה, אשר עלולה לפגוע ביכולת ההעברה של תוצאות עכברים לבני אדם, שכן בני אדם החיים בחברות מודרניות מבלים את רוב זמנם בתנאים תרמו-נייטרליים (מכיוון שיחס השטח הנמוך יותר שלנו בין פני השטח לנפח הופך אותנו לפחות רגישים לטמפרטורה, שכן אנו יוצרים סביבנו אזור תרמו-נייטרלי (TNZ). EE מעל קצב חילוף החומרים הבסיסי) משתרע על פני ~19 עד 30 מעלות צלזיוס , בעוד שלעכברים יש פס גבוה וצר יותר המשתרע על פני 2-4 מעלות צלזיוס בלבד . למעשה, היבט חשוב זה זכה לתשומת לב רבה בשנים האחרונות , ... לכן, השאלה האם הטמפרטורה הקריטית התחתונה בטווח התרמו-נייטרלי בעכברים בעלי ברך אחת קרובה יותר ל-25°C או קרובה יותר ל-30°C4, 7, 8, 10, 12 נותרה שנויה במחלוקת. EE ופרמטרים מטבוליים אחרים הוגבלו לשעות עד ימים, כך שהמידה שבה חשיפה ממושכת לטמפרטורות שונות יכולה להשפיע על פרמטרים מטבוליים כגון משקל גוף אינה ברורה. צריכה ממושכת, ניצול סובסטרט, סבילות לגלוקוז, וריכוזי ליפידים וגלוקוז בפלזמה והורמונים המווסתים תיאבון. בנוסף, יש צורך במחקר נוסף כדי לברר באיזו מידה תזונה עשויה להשפיע על פרמטרים אלה (עכברי DIO בדיאטה דלת שומן עשויים להיות מכוונים יותר לתזונה מבוססת הנאה (הדונית)). כדי לספק מידע נוסף בנושא זה, בדקנו את השפעת טמפרטורת הגידול על הפרמטרים המטבוליים הנ"ל בעכברים זכרים בוגרים במשקל תקין ועכברים זכרים הסובלים מהשמנת יתר המושרה על ידי תזונה (DIO) בדיאטה דלת שומן של 45%. עכברים הוחזקו בטמפרטורה של 22, 25, 27.5 או 30°C למשך שלושה שבועות לפחות. טמפרטורות מתחת ל-22 מעלות צלזיוס לא נחקרו מכיוון שדיור סטנדרטי של בעלי חיים לעיתים רחוקות נמוך מטמפרטורת החדר. מצאנו שעכברים במשקל תקין ובעלי מעגל יחיד של DIO הגיבו באופן דומה לשינויים בטמפרטורת המתחם מבחינת EE וללא קשר לתנאי המתחם (עם או בלי מחסה/חומר קינון). עם זאת, בעוד שעכברים במשקל תקין התאימו את צריכת המזון שלהם בהתאם ל-EE, צריכת המזון של עכברי DIO הייתה במידה רבה בלתי תלויה ב-EE, וכתוצאה מכך עכברים עלו במשקל רב יותר. על פי נתוני משקל גוף, ריכוזי ליפידים וגופי קטון בפלזמה הראו כי לעכברי DIO ב-30 מעלות צלזיוס היה מאזן אנרגיה חיובי יותר מאשר לעכברים ב-22 מעלות צלזיוס. הסיבות הבסיסיות להבדלים באיזון צריכת האנרגיה וה-EE בין עכברים במשקל תקין לעכברים ב-DIO דורשות מחקר נוסף, אך עשויות להיות קשורות לשינויים פתופיזיולוגיים בעכברי DIO ולהשפעה של דיאטה מבוססת הנאה כתוצאה מתזונה שמנה.
EE עלה באופן ליניארי מ-30 ל-22°C והיה גבוה בכ-30% ב-22°C בהשוואה ל-30°C (איור 1א',ב'). קצב החליפין הנשימתי (RER) היה בלתי תלוי בטמפרטורה (איור 1ג',ד'). צריכת המזון הייתה עקבית עם הדינמיקה של EE וגדלה עם ירידה בטמפרטורה (גם גבוהה בכ-30% ב-22°C בהשוואה ל-30°C (איור 1ה',ו'). צריכת מים. נפח ורמת הפעילות לא היו תלויים בטמפרטורה (איור 1ז').
עכברים זכרים (C57BL/6J, בני 20 שבועות, דיור אינדיבידואלי, n=7) שוכנו בכלובים מטבוליים בטמפרטורה של 22°C במשך שבוע לפני תחילת המחקר. יומיים לאחר איסוף נתוני הרקע, הטמפרטורה הועלתה במרווחים של 2°C בשעה 06:00 ביום (תחילת שלב האור). הנתונים מוצגים כממוצע ± סטיית התקן של הממוצע, ושלב החושך (18:00-06:00) מיוצג על ידי תיבה אפורה. א. הוצאת אנרגיה (קק"ל/שעה), ב. הוצאת אנרגיה כוללת בטמפרטורות שונות (קק"ל/24 שעות), ג. קצב חילוף נשימתי (VCO2/VO2: 0.7-1.0), ד. RER ממוצע בשלב האור והחושך (VCO2 /VO2) (ערך אפס מוגדר כ-0.7). e צריכת מזון מצטברת (g), f צריכת מזון כוללת ב-24 שעות, g צריכת מים כוללת ב-24 שעות (ml), h צריכת מים כוללת ב-24 שעות, i רמת פעילות מצטברת (m) ו-j רמת פעילות כוללת (m/24h). העכברים הוחזקו בטמפרטורה המצוינת למשך 48 שעות. הנתונים המוצגים עבור 24, 26, 28 ו-30°C מתייחסים ל-24 השעות האחרונות של כל מחזור. העכברים נותרו מוזנים לאורך כל המחקר. מובהקות סטטיסטית נבדקה על ידי מדידות חוזרות של ANOVA חד כיווני ולאחר מכן מבחן ההשוואה המרובה של Tukey. כוכביות מציינות מובהקות עבור ערך התחלתי של 22°C, הצללה מציינת מובהקות בין קבוצות אחרות כפי שמצוין. *P < 0.05, **P < 0.01, **P < 0.001, ****P < 0.0001. *P < 0.05, **P < 0.01, **P < 0.001, ****P < 0.0001. *P <0.05, **P <0.01, **P <0.001, ****P <0.0001. *P<0.05, **P<0.01, **P<0.001, ****P<0.0001. *P < 0.05,**P < 0.01,**P < 0.001,****P < 0.0001. *P < 0.05,**P < 0.01,**P < 0.001,****P < 0.0001. *P <0.05, **P <0.01, **P <0.001, ****P <0.0001. *P<0.05, **P<0.01, **P<0.001, ****P<0.0001.חושבו ערכים ממוצעים לכל תקופת הניסוי (0-192 שעות). n = 7.
כמו במקרה של עכברים במשקל תקין, צריכת המזון (EE) עלתה באופן ליניארי עם ירידה בטמפרטורה, ובמקרה זה, גם ה-EE היה גבוה בכ-30% ב-22°C בהשוואה ל-30°C (איור 2א',ב'). ערך ה-RER לא השתנה בטמפרטורות שונות (איור 2ג',ד'). בניגוד לעכברים במשקל תקין, צריכת המזון לא הייתה עקבית עם EE כפונקציה של טמפרטורת החדר. צריכת מזון, צריכת מים ורמת פעילות היו בלתי תלויות בטמפרטורה (איורים 2ה'-י').
עכברי DIO זכרים (C57BL/6J, 20 שבועות) שוכנו כלובים מטבוליים בטמפרטורה של 22 מעלות צלזיוס במשך שבוע לפני תחילת המחקר. עכברים יכלו להשתמש ב-45% HFD באופן חופשי. לאחר התאקלמות של יומיים, נאספו נתוני בסיס. לאחר מכן, הטמפרטורה הועלתה במרווחים של 2 מעלות צלזיוס כל יומיים בשעה 06:00 (תחילת שלב האור). הנתונים מוצגים כממוצע ± סטיית התקן של הממוצע, ושלב החושך (18:00-06:00) מיוצג על ידי תיבה אפורה. א. הוצאת אנרגיה (קק"ל/שעה), ב. הוצאת אנרגיה כוללת בטמפרטורות שונות (קק"ל/24 שעות), ג. קצב חילוף נשימתי (VCO2/VO2: 0.7-1.0), ד. RER ממוצע בשלב האור והחושך (VCO2 /VO2) (ערך אפס מוגדר כ-0.7). e צריכת מזון מצטברת (g), f צריכת מזון כוללת ב-24 שעות, g צריכת מים כוללת ב-24 שעות (ml), h צריכת מים כוללת ב-24 שעות, i רמת פעילות מצטברת (m) ו-j רמת פעילות כוללת (m/24h). העכברים הוחזקו בטמפרטורה המצוינת למשך 48 שעות. הנתונים המוצגים עבור 24, 26, 28 ו-30°C מתייחסים ל-24 השעות האחרונות של כל מחזור. העכברים הוחזקו ב-45% HFD עד סוף המחקר. מובהקות סטטיסטית נבדקה על ידי מדידות חוזרות של ANOVA חד כיווני ולאחר מכן מבחן ההשוואה המרובה של Tukey. כוכביות מציינות מובהקות עבור ערך התחלתי של 22°C, הצללה מציינת מובהקות בין קבוצות אחרות כפי שמצוין. *P < 0.05, ***P < 0.001, ****P < 0.0001. *P < 0.05, ***P < 0.001, ****P < 0.0001. *Р<0,05, ***Р<0,001, ****Р<0,0001. *P<0.05, ***P<0.001, ****P<0.0001. *P < 0.05, ***P < 0.001, ****P < 0.0001. *P < 0.05, ***P < 0.001, ****P < 0.0001. *Р<0,05, ***Р<0,001, ****Р<0,0001. *P<0.05, ***P<0.001, ****P<0.0001.חושבו ערכים ממוצעים לכל תקופת הניסוי (0-192 שעות). n = 7.
בסדרת ניסויים נוספת, בדקנו את השפעת טמפרטורת הסביבה על אותם פרמטרים, אך הפעם בין קבוצות של עכברים שהוחזקו כל הזמן בטמפרטורה מסוימת. העכברים חולקו לארבע קבוצות כדי למזער שינויים סטטיסטיים בממוצע ובסטיית התקן של משקל גוף, שומן ומשקל גוף תקין (איור 3א'-ג'). לאחר 7 ימי התאקלמות, נרשמו 4.5 ימי EE. EE מושפע באופן משמעותי מטמפרטורת הסביבה הן בשעות היום והן בלילה (איור 3ד'), ועולה באופן ליניארי ככל שהטמפרטורה יורדת מ-27.5°C ל-22°C (איור 3ה'). בהשוואה לקבוצות אחרות, ה-RER של הקבוצה ב-25°C ירד במידה מסוימת, ולא נמצאו הבדלים בין הקבוצות הנותרות (איור 3ו',ז'). צריכת מזון במקביל לדפוס EE a גדלה בכ-30% ב-22°C בהשוואה ל-30°C (איור 3ח',ט'). צריכת המים ורמות הפעילות לא היו שונות באופן משמעותי בין הקבוצות (איור 3י',ק'). חשיפה לטמפרטורות שונות למשך עד 33 ימים לא הובילה להבדלים במשקל הגוף, במסה הרזה ובמסת השומן בין הקבוצות (איור 3n-s), אך הביאה לירידה של כ-15% במסת הגוף הרזה בהשוואה לציונים שדווחו על ידי המטופל (איור 3n-s). 3b, r, c)) ומסת השומן גדלה ביותר מפי 2 (מ-1 גרם ל-2-3 גרם, איור 3c, t, c). לרוע המזל, לארון בטמפרטורה של 30°C יש שגיאות כיול ואינו יכול לספק נתוני EE ו-RER מדויקים.
- משקל גוף (א), מסת גוף רזה (ב) ומסת שומן (ג) לאחר 8 ימים (יום לפני ההעברה למערכת SABLE). ד צריכת אנרגיה (קק"ל/שעה). ה צריכת אנרגיה ממוצעת (0–108 שעות) בטמפרטורות שונות (קק"ל/24 שעות). ו יחס חליפין נשימתי (RER) (VCO2/VO2). ז RER ממוצע (VCO2/VO2). ח צריכת מזון כוללת (גרם). i צריכת מזון ממוצעת (גרם/24 שעות). י צריכת מים כוללת (מ"ל). k צריכת מים ממוצעת (מ"ל/24 שעות). l רמת פעילות מצטברת (מטר). m רמת פעילות ממוצעת (מטר/24 שעות). n משקל גוף ביום ה-18, o שינוי במשקל גוף (מיום ה-8- ליום ה-18), p מסת גוף רזה ביום ה-18, q שינוי במסת גוף רזה (מיום ה-8- ליום ה-18), r מסת שומן ביום ה-18, ושינוי במסת שומן (מיום ה-8- ליום ה-18). המובהקות הסטטיסטית של מדידות חוזרות נבדקה באמצעות Oneway-ANOVA ולאחר מכן מבחן ההשוואה המרובה של Tukey. *P < 0.05, **P < 0.01, ***P < 0.001, ****P < 0.0001. *P < 0.05, **P < 0.01, ***P < 0.001, ****P < 0.0001. *P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001, ****P <0.0001. *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001, ****P<0.0001. *P < 0.05,**P < 0.01,***P < 0.001,****P < 0.0001. *P < 0.05,**P < 0.01,***P < 0.001,****P < 0.0001. *P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001, ****P <0.0001. *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001, ****P<0.0001.הנתונים מוצגים כממוצע + סטיית התקן של הממוצע, השלב החשוך (18:00-06:00) מיוצג על ידי משבצות אפורות. הנקודות בהיסטוגרמות מייצגות עכברים בודדים. ערכים ממוצעים חושבו עבור כל תקופת הניסוי (0-108 שעות). n = 7.
עכברים הותאמו במשקל גוף, מסה רזה ומסת שומן בנקודת ההתחלה (איורים 4א'-ג') ונשמרו על 22, 25, 27.5 ו-30 מעלות צלזיוס כמו במחקרים עם עכברים במשקל תקין. בהשוואה לקבוצות של עכברים, הקשר בין EE לטמפרטורה הראה קשר ליניארי דומה עם הטמפרטורה לאורך זמן באותם עכברים. לפיכך, עכברים שהוחזקו ב-22 מעלות צלזיוס צרכו כ-30% יותר אנרגיה מאשר עכברים שהוחזקו ב-30 מעלות צלזיוס (איור 4ד', ה'). בחקירת השפעות בבעלי חיים, הטמפרטורה לא תמיד השפיעה על RER (איור 4ו', ז'). צריכת מזון, צריכת מים ופעילות לא הושפעו באופן משמעותי מהטמפרטורה (איורים 4ח'-מ'). לאחר 33 ימי גידול, עכברים ב-30 מעלות צלזיוס היו בעלי משקל גוף גבוה משמעותית מאשר עכברים ב-22 מעלות צלזיוס (איור 4נ'). בהשוואה לנקודות הבסיס שלהם, לעכברים שגודלו ב-30°C היה משקל גוף גבוה משמעותית מאשר לעכברים שגודלו ב-22°C (ממוצע ± סטיית תקן של הממוצע: איור 4o). העלייה הגבוהה יחסית במשקל נבעה מעלייה במסת השומן (איור 4p, q) ולא מעלייה במסה הרזה (איור 4r, s). בהתאם לערך EE הנמוך יותר ב-30°C, הביטוי של מספר גנים של BAT המגבירים את תפקוד/פעילות BAT הופחת ב-30°C בהשוואה ל-22°C: Adra1a, Adrb3 ו-Prdm16. גנים מרכזיים אחרים שגם הם מגבירים את תפקוד/פעילות BAT לא הושפעו: Sema3a (ויסות צמיחת נוירטים), Tfam (ביוגנזה מיטוכונדריאלית), Adrb1, Adra2a, Pck1 (גלוקונאוגנזה) ו-Cpt1a. באופן מפתיע, Ucp1 ו-Vegf-a, הקשורים לפעילות תרמוגנית מוגברת, לא ירדו בקבוצת 30°C. למעשה, רמות Ucp1 בשלושה עכברים היו גבוהות יותר מאשר בקבוצת ה-22 מעלות צלזיוס, ורמות Vegf-a ו-Adrb2 היו גבוהות משמעותית. בהשוואה לקבוצת ה-22 מעלות צלזיוס, עכברים שהוחזקו בטמפרטורה של 25 מעלות צלזיוס ו-27.5 מעלות צלזיוס לא הראו שינוי (איור משלים 1).
- משקל גוף (א), מסת גוף רזה (ב) ומסת שומן (ג) לאחר 9 ימים (יום לפני ההעברה למערכת SABLE). ד צריכת אנרגיה (EE, קק"ל/שעה). ה צריכת אנרגיה ממוצעת (0–96 שעות) בטמפרטורות שונות (קק"ל/24 שעות). ו יחס חליפין נשימתי (RER, VCO2/VO2). ז RER ממוצע (VCO2/VO2). ח צריכת מזון כוללת (גרם). ט צריכת מזון ממוצעת (גרם/24 שעות). י צריכת מים כוללת (מ"ל). k צריכת מים ממוצעת (מ"ל/24 שעות). ל רמת פעילות מצטברת (מ'). מ' רמת פעילות ממוצעת (מ'/24 שעות). n משקל גוף ביום 23 (גרם), o שינוי במשקל גוף, p מסת גוף רזה, q שינוי במסת גוף רזה (גרם) ביום 23 בהשוואה ליום 9, שינוי במסת שומן (גרם) ביום 23, מסת שומן (גרם) בהשוואה ליום 8, יום 23 בהשוואה ליום ה-8. המובהקות הסטטיסטית של מדידות חוזרות נבדקה באמצעות Oneway-ANOVA ולאחר מכן מבחן ההשוואה המרובה של Tukey. *P < 0.05, ***P < 0.001, ****P < 0.0001. *P < 0.05, ***P < 0.001, ****P < 0.0001. *Р<0,05, ***Р<0,001, ****Р<0,0001. *P<0.05, ***P<0.001, ****P<0.0001. *P < 0.05, ***P < 0.001, ****P < 0.0001. *P < 0.05, ***P < 0.001, ****P < 0.0001. *Р<0,05, ***Р<0,001, ****Р<0,0001. *P<0.05, ***P<0.001, ****P<0.0001.הנתונים מוצגים כממוצע + סטיית התקן של הממוצע, השלב החשוך (18:00-06:00) מיוצג על ידי משבצות אפורות. הנקודות בהיסטוגרמות מייצגות עכברים בודדים. ערכי הממוצע חושבו עבור כל תקופת הניסוי (0-96 שעות). n = 7.
כמו בני אדם, עכברים יוצרים לעתים קרובות מיקרו-סביבות כדי להפחית את אובדן החום לסביבה. כדי לכמת את חשיבותה של סביבה זו עבור EE, הערכנו את ה-EE ב-22, 25, 27.5 ו-30 מעלות צלזיוס, עם או בלי מגיני עור וחומר קינון. ב-22 מעלות צלזיוס, תוספת של עורות סטנדרטיים מפחיתה את ה-EE בכ-4%. התוספת שלאחר מכן של חומר קינון הפחיתה את ה-EE ב-3-4% (איור 5א',ב'). לא נצפו שינויים משמעותיים ב-RER, צריכת מזון, צריכת מים או רמות פעילות עם הוספת בתים או עורות + מצעים (איור 5י-פ'). תוספת של עור וחומר קינון גם הפחיתה משמעותית את ה-EE ב-25 ו-30 מעלות צלזיוס, אך התגובות היו קטנות יותר מבחינה כמותית. ב-27.5 מעלות צלזיוס לא נצפה הבדל. ראוי לציין שבניסויים אלה, ה-EE ירד עם עליית הטמפרטורה, במקרה זה נמוך בכ-57% מ-EE ב-30 מעלות צלזיוס בהשוואה ל-22 מעלות צלזיוס (איור 5ג'-ח'). אותו ניתוח בוצע רק עבור השלב הקל, שבו ה-EE היה קרוב יותר לקצב חילוף החומרים הבסיסי, שכן במקרה זה העכברים נחו בעיקר על העור, וכתוצאה מכך גדלי אפקט דומים בטמפרטורות שונות (איור משלים 2a-h).
נתונים עבור עכברים ממקלט וחומר קינון (כחול כהה), בית אך ללא חומר קינון (כחול בהיר), וחומר בית וקן (כתום). צריכת אנרגיה (EE, קק"ל/שעה) עבור חדרים a, c, e ו-g ב-22, 25, 27.5 ו-30 מעלות צלזיוס, b, d, f ו-h ממוצעים של EE (קק"ל/שעה). ip נתונים עבור עכברים השוהים ב-22 מעלות צלזיוס: i קצב נשימה (RER, VCO2/VO2), j RER ממוצע (VCO2/VO2), k צריכת מזון מצטברת (g), l צריכת מזון ממוצעת (g/24 h), m צריכת מים כוללת (mL), n צריכת מים ממוצעת AUC (mL/24h), o פעילות כוללת (m), p רמת פעילות ממוצעת (m/24h). הנתונים מוצגים כממוצע + סטיית תקן של הממוצע, השלב החשוך (18:00-06:00 h) מיוצג על ידי משבצות אפורות. הנקודות בהיסטוגרמות מייצגות עכברים בודדים. המובהקות הסטטיסטית של מדידות חוזרות נבדקה באמצעות Oneway-ANOVA ולאחר מכן מבחן ההשוואה המרובה של Tukey. *P < 0.05, **P < 0.01. *P < 0.05, **P < 0.01. *Δ<0,05, **Δ<0,01. *P<0.05, **P<0.01. *P < 0.05, **P < 0.01.** *P < 0.05, **P < 0.01.** *Δ<0,05, **Δ<0,01. *P<0.05, **P<0.01.חושבו ערכים ממוצעים לכל תקופת הניסוי (0-72 שעות). n = 7.
בעכברים במשקל תקין (2-3 שעות צום), גידול בטמפרטורות שונות לא הביא להבדלים משמעותיים בריכוזי הפלזמה של TG, 3-HB, כולסטרול, ALT ו-AST, אלא ב-HDL כפונקציה של הטמפרטורה. איור 6a-e). ריכוזי הפלזמה בצום של לפטין, אינסולין, C-פפטיד וגלוקגון גם הם לא היו שונים בין הקבוצות (איורים 6g-j). ביום מבחן הסבילות לגלוקוז (לאחר 31 ימים בטמפרטורות שונות), רמת הגלוקוז הבסיסית בדם (5-6 שעות צום) הייתה כ-6.5 mM, ללא הבדל בין הקבוצות. מתן גלוקוז דרך הפה הגביר את ריכוזי הגלוקוז בדם באופן משמעותי בכל הקבוצות, אך גם ריכוז השיא וגם השטח מתחת לעקומות (iAUCs) הנוספות (15-120 דקות) היו נמוכים יותר בקבוצת העכברים ששוכנו בטמפרטורה של 30 מעלות צלזיוס (נקודות זמן בודדות: P < 0.05-P < 0.0001, איור 6k, l) בהשוואה לעכברים ששוכנו בטמפרטורה של 22, 25 ו-27.5 מעלות צלזיוס (אשר לא היו הבדלים זה בזה). מתן גלוקוז דרך הפה הגביר את ריכוזי הגלוקוז בדם באופן משמעותי בכל הקבוצות, אך גם ריכוז השיא וגם השטח מתחת לעקומות (iAUCs) הנוספות (15-120 דקות) היו נמוכים יותר בקבוצת העכברים ששוכנו בטמפרטורה של 30 מעלות צלזיוס (נקודות זמן בודדות: P < 0.05-P < 0.0001, איור 6k, l) בהשוואה לעכברים ששוכנו בטמפרטורה של 22, 25 ו-27.5 מעלות צלזיוס (אשר לא היו הבדלים זה בזה). Пероральное введение глюкозы значительно повышало концентрацию глюкозы в крови во всех групопах, концентрация, так и площадь приращения под кривыми (iAUC) (15–120 מינ.) מעלות צלזיוס (טכניות מהירות: P < 0,05–P < 0,0001, פיקס. 6k, 1) בטווח הארוך, תנאי שימוש 22, 25 ו-27,5 מעלות צלזיוס (которые не различались между собой). מתן גלוקוז דרך הפה הגביר משמעותית את ריכוזי הגלוקוז בדם בכל הקבוצות, אך גם ריכוז השיא וגם השטח מתחת לעקומות (iAUC) (15-120 דקות) היו נמוכים יותר בקבוצת העכברים שקיבלו טמפרטורה של 30°C (נקודות זמן נפרדות: P < 0.05-P < 0.0001, איור 6k, l) בהשוואה לעכברים שנשמרו בטמפרטורה של 22, 25 ו-27.5°C (אשר לא היו שונות זו מזו).口服葡萄糖的给药显着增加了所有组的血糖浓度，但在30°C饲养的小鼠组中，峰值浓度和曲线下增加面积(iAUC) (15-120 分钟) 均较佗钟 均较低Ｊ炄各0.05–P < 0.0001，图6k，l）与饲养在22、25 和27.5°C 的小鼠（彼此之间没有差异）相比.口服 葡萄糖 的 给 药 显着 了 所有组 的 血糖 浓度 但 在 在 在 在 30 מעלות צלזיוס 饰 养浓度 和 曲线 下 增加 面积 面积 (IAUC) (15-120 分钟) 均 较 低 各 个 点 点 点 < 点繂 . 0.0001，图6k，l）与饲养在22、25和27.5°C 的小鼠（彼此之间没有差异）相比מתן דרך הפה של גלוקוז הגביר משמעותית את ריכוזי הגלוקוז בדם בכל הקבוצות, אך גם ריכוז השיא וגם השטח מתחת לעקומה (iAUC) (15-120 דקות) היו נמוכים יותר בקבוצת העכברים שקיבלו טיפול ב-30°C (כל נקודות הזמן).: P < 0,05–P < 0,0001, рис. P < 0.05–P < 0.0001, איור.6l, l) בהשוואה לעכברים שהוחזקו בטמפרטורה של 22, 25 ו-27.5 מעלות צלזיוס (אין הבדל זה מזה).
ריכוזי הפלזמה של TG, 3-HB, כולסטרול, HDL, ALT, AST, FFA, גליצרול, לפטין, אינסולין, C-פפטיד וגלוקגון מוצגים בעכברי DIO(al) זכרים בוגרים לאחר 33 ימים של האכלה בטמפרטורה המצוינת. עכברים לא ניזונו 2-3 שעות לפני דגימת הדם. היוצא מן הכלל היה מבחן סבילות לגלוקוז דרך הפה, שבוצע יומיים לפני סיום המחקר על עכברים שצמו במשך 5-6 שעות ונשמרו בטמפרטורה המתאימה במשך 31 ימים. עכברים עברו אתגר של 2 גרם/ק"ג משקל גוף. נתוני השטח מתחת לעקומה (L) מבוטאים כנתונים מצטברים (iAUC). הנתונים מוצגים כממוצע ± SEM. הנקודות מייצגות דגימות בודדות. *P < 0.05, **P < 0.01, **P < 0.001, ****P < 0.0001, n = 7. *P < 0.05, **P < 0.01, **P < 0.001, ****P < 0.0001, n = 7. *P <0.05, **P <0.01, **P <0.001, ****P <0.0001, n = 7. *P<0.05, **P<0.01, **P<0.001, ****P<0.0001, n=7. *P < 0.05,**P < 0.01,**P < 0.001,****P < 0.0001,n = 7. *P < 0.05,**P < 0.01,**P < 0.001,****P < 0.0001,n = 7. *P <0.05, **P <0.01, **P <0.001, ****P <0.0001, n = 7. *P<0.05, **P<0.01, **P<0.001, ****P<0.0001, n=7.
בעכברי DIO (שגם הם צמו במשך 2-3 שעות), ריכוזי הכולסטרול, HDL, ALT, AST ו-FFA בפלזמה לא היו שונים בין הקבוצות. גם TG וגם גליצרול היו גבוהים משמעותית בקבוצת ה-30°C בהשוואה לקבוצת ה-22°C (איורים 7א'-ח'). לעומת זאת, 3-GB היה נמוך בכ-25% ב-30°C בהשוואה ל-22°C (איור 7ב'). לכן, למרות שלעכברים שנשמרו ב-22°C היה מאזן אנרגטי חיובי כללי, כפי שמצביעה עלייה במשקל, הבדלים בריכוזי הפלזמה של TG, גליצרול ו-3-HB מצביעים על כך שעכברים ב-22°C כאשר הדגימה הייתה נמוכה יותר מאשר ב-22°C. עכברים שגודלו ב-30°C היו במצב אנרגטי שלילי יחסית יותר. בהתאם לכך, ריכוזי הכבד של גליצרול ו-TG הניתנים לחילוץ, אך לא גליקוגן וכולסטרול, היו גבוהים יותר בקבוצת ה-30°C (איור משלים 3א'-ד'). כדי לבדוק האם ההבדלים התלויים בטמפרטורה בליפוליזה (כפי שנמדדו על ידי רמות טריגליצרידים וגליצרול בפלזמה) הם תוצאה של שינויים פנימיים בשומן באפידידימלי או במפשעה, הוצאנו רקמת שומן ממאגרים אלה בסוף המחקר וכימותנו את כמות חומצות השומן החופשיות (ex vivo) ואת שחרור הגליצרול. בכל קבוצות הניסוי, דגימות רקמת שומן ממאגרים באפידידימלי ובמפשעה הראו עלייה של לפחות פי שניים בייצור גליצרול ו-FFA בתגובה לגירוי איזופרוטרנול (איור משלים 4a-4d). עם זאת, לא נמצאה השפעה של טמפרטורת הקליפה על ליפוליזה בסיסית או מגורה על ידי איזופרוטרנול. בהתאם למשקל גוף גבוה יותר ולמסת שומן גבוהה יותר, רמות הלפטין בפלזמה היו גבוהות משמעותית בקבוצת ה-30°C מאשר בקבוצת ה-22°C (איור 7i). להיפך, רמות האינסולין ופפטיד-C בפלזמה לא היו שונות בין קבוצות הטמפרטורה (איור 7k, k), אך גלוקגון בפלזמה הראה תלות בטמפרטורה, אך במקרה זה כמעט 22°C בקבוצה הנגדית היו כפולים בהשוואה ל-30°C. מקבוצה C (איור 7l). FGF21 לא היה שונה בין קבוצות הטמפרטורה השונות (איור 7m). ביום בדיקת OGTT, רמת הגלוקוז בדם הבסיסית הייתה כ-10 mM ולא הייתה שונה בין עכברים ששוכנו בטמפרטורות שונות (איור 7n). מתן גלוקוז דרך הפה העלה את רמות הגלוקוז בדם והגיע לשיא בכל הקבוצות בריכוז של כ-18 mM 15 דקות לאחר המינון. לא נמצאו הבדלים משמעותיים ב-iAUC (15-120 דקות) ובריכוזים בנקודות זמן שונות לאחר המינון (15, 30, 60, 90 ו-120 דקות) (איור 7n, o).
ריכוזי פלזמה של TG, 3-HB, כולסטרול, HDL, ALT, AST, FFA, גליצרול, לפטין, אינסולין, C-פפטיד, גלוקגון ו-FGF21 נצפו בעכברים זכרים בוגרים מסוג DIO (ao) לאחר 33 ימי האכלה. טמפרטורה מוגדרת. עכברים לא ניזונו 2-3 שעות לפני דגימת הדם. מבחן הסבילות לגלוקוז דרך הפה היה יוצא מן הכלל, שכן הוא בוצע במינון של 2 גרם/ק"ג משקל גוף יומיים לפני סיום המחקר בעכברים שצמו במשך 5-6 שעות ונשמרו בטמפרטורה המתאימה במשך 31 ימים. נתוני השטח מתחת לעקומה (o) מוצגים כנתונים מצטברים (iAUC). הנתונים מוצגים כממוצע ± SEM. הנקודות מייצגות דגימות בודדות. *P < 0.05, **P < 0.01, **P < 0.001, ****P < 0.0001, n = 7. *P < 0.05, **P < 0.01, **P < 0.001, ****P < 0.0001, n = 7. *P <0.05, **P <0.01, **P <0.001, ****P <0.0001, n = 7. *P<0.05, **P<0.01, **P<0.001, ****P<0.0001, n=7. *P < 0.05,**P < 0.01,**P < 0.001,****P < 0.0001,n = 7. *P < 0.05,**P < 0.01,**P < 0.001,****P < 0.0001,n = 7. *P <0.05, **P <0.01, **P <0.001, ****P <0.0001, n = 7. *P<0.05, **P<0.01, **P<0.001, ****P<0.0001, n=7.
יכולת ההעברה של נתוני מכרסמים לבני אדם היא סוגיה מורכבת הממלאת תפקיד מרכזי בפירוש חשיבות התצפיות בהקשר של מחקר פיזיולוגי ופרמקולוגי. מסיבות כלכליות וכדי להקל על המחקר, עכברים מוחזקים לעתים קרובות בטמפרטורת החדר מתחת לאזור התרמו-נייטרלי שלהם, וכתוצאה מכך מפעילים מערכות פיזיולוגיות מפצות שונות המגבירות את קצב חילוף החומרים ופוגעות באופן פוטנציאלי ביכולת התרגום9. לפיכך, חשיפת עכברים לקור עשויה להפוך עכברים לעמידים להשמנת יתר הנגרמת על ידי תזונה ועשויה למנוע היפרגליקמיה בחולדות שטופלו בסטרפטוזוטוצין עקב הובלת גלוקוז מוגברת שאינה תלויה באינסולין. עם זאת, לא ברור באיזו מידה חשיפה ממושכת לטמפרטורות רלוונטיות שונות (מחדר לטמפרטורות תרמו-נייטרליות) משפיעה על הומאוסטזיס אנרגטי שונה של עכברים במשקל תקין (שנמצאים במזון) ועכברי DIO (שנמצאים ב-HFD) ועל פרמטרים מטבוליים, כמו גם את המידה שבה הם הצליחו לאזן עלייה ב-EE עם עלייה בצריכת מזון. המחקר המוצג במאמר זה שואף להביא מעט בהירות לנושא זה.
אנו מראים כי בעכברים בוגרים במשקל תקין ובעכברי DIO זכרים, EE נמצא ביחס הפוך לטמפרטורת החדר בין 22 ל-30 מעלות צלזיוס. לכן, EE ב-22 מעלות צלזיוס היה גבוה בכ-30% מאשר ב-30 מעלות צלזיוס בשני מודלי העכברים. עם זאת, הבדל חשוב בין עכברים במשקל תקין לעכברי DIO הוא שבעוד שעכברים במשקל תקין התאימו EE בטמפרטורות נמוכות יותר על ידי התאמת צריכת המזון בהתאם, צריכת המזון של עכברי DIO השתנתה ברמות שונות. טמפרטורות המחקר היו דומות. לאחר חודש, עכברי DIO שהוחזקו ב-30 מעלות צלזיוס עלו ביותר משקל גוף ומסת שומן מאשר עכברים שהוחזקו ב-22 מעלות צלזיוס, בעוד שבני אדם תקינים שהוחזקו באותה טמפרטורה ולאותו פרק זמן לא הובילו לחום. בהשוואה לטמפרטורות ליד טמפרטורה תרמו-נייטרלית או בטמפרטורת החדר, גדילה בטמפרטורת החדר הביאה לכך שעכברים במשקל DIO או במשקל תקין שהיו בדיאטה עתירת שומן אך לא בדיאטה תקינה של עכברים, עלו במשקל פחות יחסית. נתמך על ידי מחקרים אחרים17,18,19,20,21 אך לא על ידי כולם22,23.
ההשערה היא שהיכולת ליצור מיקרו-סביבה להפחתת אובדן חום מזיזה את הנייטרליות התרמית שמאלה8, 12. במחקר שלנו, גם הוספת חומר קינון וגם הסתרה הפחיתו את ה-EE אך לא הביאו לנייטרליות תרמית עד 28°C. לכן, הנתונים שלנו אינם תומכים בכך שנקודת השפל של נייטרליות תרמית בעכברים בוגרים בעלי ברך אחת, עם או בלי בתים מועשרים בסביבה, צריכה להיות 26-28°C כפי שמוצג8,12, אך הם תומכים במחקרים אחרים המראים נייטרליות תרמית. טמפרטורות של 30°C בעכברים בעלי נקודה נמוכה7, 10, 24. כדי לסבך את העניינים, הוכח שנקודת הנייטרליות התרמית בעכברים אינה סטטית במהלך היום מכיוון שהיא נמוכה יותר בשלב המנוחה (האור), אולי עקב ייצור קלוריות נמוך יותר כתוצאה מפעילות ותרמוגנזה הנגרמת על ידי תזונה. לכן, בשלב האור, נקודת הנייטרליות התרמית הנמוכה יותר מתגלה כ-29°C, ובשלב החושך, ~33°C25.
בסופו של דבר, הקשר בין טמפרטורת הסביבה לצריכת האנרגיה הכוללת נקבע על ידי פיזור חום. בהקשר זה, היחס בין שטח הפנים לנפח הוא גורם חשוב הקובע את הרגישות התרמית, המשפיע הן על פיזור החום (שטח פנים) והן על יצירת החום (נפח). בנוסף לשטח הפנים, העברת החום נקבעת גם על ידי בידוד (קצב העברת החום). בבני אדם, מסת שומן יכולה להפחית את אובדן החום על ידי יצירת מחסום מבודד סביב קליפת הגוף, והוצע שמסת שומן חשובה גם לבידוד תרמי בעכברים, מורידה את נקודת הניטרליות התרמית ומפחיתה את רגישות הטמפרטורה מתחת לנקודת הניטרליות התרמית (שיפוע העקומה). טמפרטורת הסביבה בהשוואה ל-EE)12. המחקר שלנו לא תוכנן להעריך ישירות את הקשר המשוער הזה מכיוון שנתוני הרכב הגוף נאספו 9 ימים לפני איסוף נתוני הוצאת האנרגיה ומכיוון שמסת השומן לא הייתה יציבה לאורך כל המחקר. עם זאת, מכיוון שלעכברים במשקל תקין ובעלי DIO יש EE נמוך ב-30% ב-30°C מאשר ב-22°C למרות הבדל של לפחות פי 5 במסת השומן, הנתונים שלנו אינם תומכים בכך שהשמנת יתר צריכה לספק גורם בידוד בסיסי, לפחות לא בטווח הטמפרטורות שנחקר. ממצא זה עולה בקנה אחד עם מחקרים אחרים שנועדו לחקור זאת טוב יותר4,24. במחקרים אלה, השפעת הבידוד של השמנת יתר הייתה קטנה, אך נמצא כי פרווה מספקת 30-50% מסך הבידוד התרמי4,24. עם זאת, בעכברים מתים, מוליכות תרמית גדלה בכ-450% מיד לאחר המוות, דבר המצביע על כך שהשפעת הבידוד של הפרווה נחוצה לפעולת מנגנונים פיזיולוגיים, כולל התכווצות כלי דם. בנוסף להבדלים בין מינים בפרווה בין עכברים לבני אדם, השפעת הבידוד הירודה של השמנת יתר בעכברים עשויה להיות מושפעת גם מהשיקולים הבאים: גורם הבידוד של מסת השומן האנושית מתווך בעיקר על ידי מסת שומן תת עורית (עובי)26,27. בדרך כלל במכרסמים פחות מ-20% מסך שומן מן החי28. בנוסף, מסת השומן הכוללת עשויה אפילו לא להיות מדד תת-אופטימלי לבידוד התרמי של הפרט, שכן נטען כי בידוד תרמי משופר מתקזז על ידי העלייה הבלתי נמנעת בשטח הפנים (ולכן אובדן חום מוגבר) ככל שמסת השומן עולה.
בעכברים במשקל תקין, ריכוזי הפלזמה בצום של TG, 3-HB, כולסטרול, HDL, ALT ו-AST לא השתנו בטמפרטורות שונות במשך כמעט 5 שבועות, כנראה משום שהעכברים היו באותו מצב של מאזן אנרגיה. הם היו זהים במשקל ובהרכב גוף כמו בסוף המחקר. בהתאם לדמיון במסת השומן, לא נמצאו גם הבדלים ברמות הלפטין בפלזמה, וגם לא באינסולין, C-פפטיד וגלוקגון בצום. אותות נוספים נמצאו בעכברי DIO. למרות שלעכברים בטמפרטורה של 22 מעלות צלזיוס גם לא היה מאזן אנרגיה שלילי כללי במצב זה (ככל שעלו במשקל), בסוף המחקר הם היו בעלי חסר אנרגיה גדול יותר יחסית בהשוואה לעכברים שגודלו בטמפרטורה של 30 מעלות צלזיוס, בתנאים כמו ייצור קטונים גבוה על ידי הגוף (3-GB) וירידה בריכוז גליצרול ו-TG בפלזמה. עם זאת, נראה כי הבדלים בליפוליזה תלויי-טמפרטורה אינם תוצאה של שינויים פנימיים בשומן האפידידימלי או המפשעה, כגון שינויים בביטוי ליפאז המגיב לאדיפוהורמון, מכיוון ש-FFA וגליצרול המשתחררים משומן המופק ממאגרים אלה נמצאים בין קבוצות הטמפרטורה דומות זו לזו. למרות שלא חקרנו את הטון הסימפתטי במחקר הנוכחי, אחרים מצאו שהוא (בהתבסס על קצב לב ולחץ דם ממוצע) קשור באופן ליניארי לטמפרטורת הסביבה בעכברים והוא נמוך בקירוב ב-30 מעלות צלזיוס מאשר ב-22 מעלות צלזיוס 20% צלזיוס. לפיכך, הבדלים תלויי-טמפרטורה בטון הסימפתטי עשויים למלא תפקיד בליפוליזה במחקר שלנו, אך מכיוון שעלייה בטון הסימפתטי מגרה ולא מעכבת ליפוליזה, מנגנונים אחרים עשויים לנטרל ירידה זו בעכברים בתרבית. תפקיד פוטנציאלי בפירוק שומן הגוף. טמפרטורת החדר. יתר על כן, חלק מההשפעה המגרה של הטון הסימפתטי על ליפוליזה מתווכת בעקיפין על ידי עיכוב חזק של הפרשת אינסולין, דבר המדגיש את ההשפעה של תוספת הפרעת אינסולין על ליפוליזה30, אך במחקר שלנו, אינסולין בפלזמה בצום וטון סימפתטי של C-פפטיד בטמפרטורות שונות לא הספיקו כדי לשנות את הליפוליזה. במקום זאת, מצאנו כי הבדלים במצב האנרגיה היו ככל הנראה התורמים העיקריים להבדלים אלה בעכברי DIO. הסיבות הבסיסיות המובילות לוויסות טוב יותר של צריכת מזון עם EE בעכברים במשקל תקין דורשות מחקר נוסף. באופן כללי, עם זאת, צריכת מזון נשלטת על ידי רמזים הומאוסטטיים והדוניים31,32,33. למרות שיש ויכוח לגבי איזה מבין שני הסימנים חשוב יותר מבחינה כמותית,31,32,33 ידוע היטב שצריכה ארוכת טווח של מזונות עתירי שומן מובילה להתנהגות אכילה מבוססת יותר על הנאה, שבמידה מסוימת אינה קשורה להומאוסטזיס. ​​. – צריכת מזון מווסתת34,35,36. לכן, התנהגות האכילה ההדונית המוגברת של עכברי DIO שטופלו ב-45% HFD עשויה להיות אחת הסיבות לכך שעכברים אלה לא איזנו את צריכת המזון עם EE. מעניין לציין, כי הבדלים בתיאבון ובהורמונים המווסתים את רמת הגלוקוז בדם נצפו גם בעכברי DIO תחת בקרת טמפרטורה, אך לא בעכברים במשקל תקין. בעכברי DIO, רמות הלפטין בפלזמה עלו עם הטמפרטורה ורמות הגלוקגון ירדו עם הטמפרטורה. המידה שבה הטמפרטורה יכולה להשפיע ישירות על הבדלים אלה ראויה למחקר נוסף, אך במקרה של לפטין, מאזן האנרגיה השלילי היחסי ולכן מסת שומן נמוכה יותר בעכברים ב-22°C בהחלט מילאו תפקיד חשוב, שכן מסת שומן ולפטין בפלזמה נמצאים בקורלציה גבוהה37. עם זאת, הפרשנות של אות הגלוקגון היא תמוהה יותר. כמו באינסולין, הפרשת גלוקגון עוכבה מאוד על ידי עלייה בטונוס הסימפתטי, אך הטונוס הסימפתטי הגבוה ביותר נחזה להיות בקבוצת 22°C, שהייתה לה ריכוזי הגלוקגון הגבוהים ביותר בפלזמה. אינסולין הוא מווסת חזק נוסף של גלוקגון בפלזמה, ועמידות לאינסולין וסוכרת מסוג 2 קשורות באופן הדוק להיפרגלוקגונמיה בצום ואחרי ארוחה 38,39. עם זאת, עכברי DIO במחקר שלנו היו גם הם חסרי רגישות לאינסולין, כך שגם זה לא יכול להיות הגורם העיקרי לעלייה באיתות גלוקגון בקבוצת 22°C. תכולת השומן בכבד קשורה באופן חיובי גם לעלייה בריכוז גלוקגון בפלזמה, שמנגנונים אלה, בתורם, עשויים לכלול עמידות לגלוקגון בכבד, ירידה בייצור אוריאה, עלייה בריכוזי חומצות אמינו במחזור הדם, והפרשת גלוקגון מוגברת המגורה על ידי חומצות אמינו 40,41,42. עם זאת, מכיוון שריכוזי גליצרול ו-TG הניתנים לחילוץ לא היו שונים בין קבוצות הטמפרטורה במחקר שלנו, גם זה לא יכול להיות גורם פוטנציאלי לעלייה בריכוזי הפלזמה בקבוצת 22°C. טרייודוטירונין (T3) ממלא תפקיד קריטי בקצב חילוף החומרים הכללי ובתחילת ההגנה המטבולית מפני היפותרמיה 43,44. לפיכך, ריכוז T3 בפלזמה, שאולי נשלט על ידי מנגנונים מרכזיים,45,46 עולה הן בעכברים והן בבני אדם בתנאים פחות תרמו-נייטרליים47, למרות שהעלייה בבני אדם קטנה יותר, דבר הנוטה יותר לעכברים. זה עולה בקנה אחד עם אובדן חום לסביבה. לא מדדנו את ריכוזי T3 בפלזמה במחקר הנוכחי, אך ייתכן שהריכוזים היו נמוכים יותר בקבוצת 30°C, דבר שעשוי להסביר את השפעת קבוצה זו על רמות הגלוקגון בפלזמה, כפי שאנו (איור 5a עודכן) ואחרים הראינו ש-T3 מגביר את רמות הגלוקגון בפלזמה באופן תלוי מינון. דווח כי הורמוני בלוטת התריס גורמים לביטוי FGF21 בכבד. כמו גלוקגון, גם ריכוזי FGF21 בפלזמה עלו עם ריכוזי T3 בפלזמה (איור משלים 5b ומקור 48), אך בהשוואה לגלוקגון, ריכוזי FGF21 בפלזמה במחקר שלנו לא הושפעו מהטמפרטורה. הסיבות הבסיסיות לפער זה דורשות מחקר נוסף, אך אינדוקציה של FGF21 המונעת על ידי T3 אמורה להתרחש ברמות גבוהות יותר של חשיפה ל-T3 בהשוואה לתגובת הגלוקגון המונעת על ידי T3 שנצפתה (איור משלים 5b).
HFD הוכח כקשור באופן הדוק לפגיעה בסבילות לגלוקוז ועמידות לאינסולין (סמנים) בעכברים שגודלו בטמפרטורה של 22 מעלות צלזיוס. עם זאת, HFD לא היה קשור לפגיעה בסבילות לגלוקוז או בעמידות לאינסולין כאשר גודל בסביבה תרמו-נייטרלית (מוגדרת כאן כ-28 מעלות צלזיוס) 19. במחקר שלנו, קשר זה לא שוחזר בעכברי DIO, אך עכברים במשקל תקין שהוחזקו בטמפרטורה של 30 מעלות צלזיוס שיפרו משמעותית את הסבילות לגלוקוז. הסיבה להבדל זה דורשת מחקר נוסף, אך עשויה להיות מושפעת מהעובדה שעכברי ה-DIO במחקר שלנו היו עמידים לאינסולין, עם ריכוזי C-פפטיד בפלזמה בצום וריכוזי אינסולין גבוהים פי 12-20 מעכברים במשקל תקין, ובדם על קיבה ריקה. ריכוזי גלוקוז של כ-10 mM (כ-6 mM במשקל גוף תקין), מה שנראה שמשאיר חלון קטן לכל השפעה מועילה פוטנציאלית של חשיפה לתנאים תרמו-נייטרליים לשיפור הסבילות לגלוקוז. גורם מבלבל אפשרי הוא שמסיבות מעשיות, OGTT מתבצע בטמפרטורת החדר. לפיכך, עכברים ששוכנו בטמפרטורות גבוהות יותר חוו הלם קור קל, אשר עשוי להשפיע על ספיגת/פינוי גלוקוז. עם זאת, בהתבסס על ריכוזי גלוקוז בדם בצום דומים בקבוצות טמפרטורה שונות, ייתכן ששינויים בטמפרטורת הסביבה לא השפיעו באופן משמעותי על התוצאות.
כפי שצוין קודם לכן, לאחרונה הודגש כי העלאת טמפרטורת החדר עשויה להחליש חלק מהתגובות לעקה קרה, דבר שעשוי להטיל ספק ביכולת ההעברה של נתוני עכברים לבני אדם. עם זאת, לא ברור מהי הטמפרטורה האופטימלית לגידול עכברים כדי לחקות את הפיזיולוגיה האנושית. התשובה לשאלה זו יכולה להיות מושפעת גם מתחום המחקר ומנקודת הסיום הנחקרת. דוגמה לכך היא השפעת התזונה על הצטברות שומן בכבד, סבילות לגלוקוז ועמידות לאינסולין19. מבחינת הוצאת אנרגיה, חלק מהחוקרים מאמינים כי ניטרליות תרמית היא הטמפרטורה האופטימלית לגידול, מכיוון שבני אדם דורשים מעט אנרגיה נוספת כדי לשמור על טמפרטורת הגוף הליבה שלהם, והם מגדירים טמפרטורת הקפה בודדת עבור עכברים בוגרים כ-30°C7,10. חוקרים אחרים מאמינים כי טמפרטורה דומה לזו שבני אדם חווים בדרך כלל עם עכברים בוגרים על ברך אחת היא 23-25°C, מכיוון שמצאו כי ניטרליות תרמית היא 26-28°C ובהתבסס על כך שבני אדם נמוכים יותר בכ-3°C, הטמפרטורה הקריטית התחתונה שלהם, המוגדרת כאן כ-23°C, היא מעט 8.12. המחקר שלנו עולה בקנה אחד עם מספר מחקרים אחרים הקובעים כי ניטרליות תרמית אינה מושגת ב-26-28°C4, 7, 10, 11, 24, 25, דבר המצביע על כך ש-23-25°C נמוך מדי. גורם חשוב נוסף שיש לקחת בחשבון בנוגע לטמפרטורת החדר ולניטרליות תרמית בעכברים הוא דיור יחיד או קבוצתי. כאשר עכברים שוכנו בקבוצות ולא בנפרד, כמו במחקר שלנו, רגישות הטמפרטורה פחתה, כנראה עקב צפיפות החיות. עם זאת, טמפרטורת החדר עדיין הייתה מתחת ל-LTL של 25 כאשר נעשה שימוש בשלוש קבוצות. ייתכן שההבדל הבין-מיניאלי החשוב ביותר בהקשר זה הוא המשמעות הכמותית של פעילות BAT כהגנה מפני היפותרמיה. לפיכך, בעוד שעכברים פיצו במידה רבה על אובדן הקלוריות הגבוה יותר שלהם על ידי הגדלת פעילות BAT, שהיא מעל 60% EE ב-5°C בלבד,51,52 התרומה של פעילות BAT אנושית ל-EE הייתה גבוהה משמעותית, קטנה בהרבה. לכן, הפחתת פעילות BAT עשויה להיות דרך חשובה להגברת התרגום האנושי. ויסות פעילות BAT הוא מורכב אך לעיתים קרובות מתווך על ידי ההשפעות המשולבות של גירוי אדרנרגי, הורמוני בלוטת התריס וביטוי UCP114,54,55,56,57. הנתונים שלנו מצביעים על כך שיש להעלות את הטמפרטורה מעל 27.5 מעלות צלזיוס בהשוואה לעכברים ב-22 מעלות צלזיוס על מנת לזהות הבדלים בביטוי גני BAT האחראים לתפקוד/הפעלה. עם זאת, ההבדלים שנמצאו בין הקבוצות ב-30 ו-22 מעלות צלזיוס לא תמיד הצביעו על עלייה בפעילות BAT בקבוצת 22 מעלות צלזיוס מכיוון ש-Ucp1, Adrb2 ו-Vegf-a היו מווסתים כלפי מטה בקבוצת 22 מעלות צלזיוס. שורש הסיבה לתוצאות הבלתי צפויות הללו טרם נקבע. אפשרות אחת היא שהביטוי המוגבר שלהם עשוי לא לשקף איתות לטמפרטורת חדר מוגברת, אלא השפעה חריפה של העברתם מ-30 מעלות צלזיוס ל-22 מעלות צלזיוס ביום ההסרה (העכברים חוו זאת 5-10 דקות לפני ההמראה).
מגבלה כללית של המחקר שלנו היא שחקרנו רק עכברים זכרים. מחקרים אחרים מצביעים על כך שמגדר עשוי להיות שיקול חשוב באינדיקציות העיקריות שלנו, מכיוון שעכברים נקבות בעלות ברך אחת רגישות יותר לטמפרטורה עקב מוליכות תרמית גבוהה יותר ושמירה על טמפרטורות ליבה מבוקרות יותר. בנוסף, עכברות (שקיבלו HFD) הראו קשר גדול יותר בין צריכת אנרגיה לבין EE ב-30 מעלות צלזיוס בהשוואה לעכברים זכרים שצרכו יותר עכברים מאותו המין (20 מעלות צלזיוס במקרה זה) 20. לכן, בעכברות, ההשפעה של תכולת הסאב-תרמונטרלית גבוהה יותר, אך בעלת דפוס זהה לזו של עכברים זכרים. במחקר שלנו, התמקדנו בעכברים זכרים נקבות בעלות ברך אחת, מכיוון שאלה התנאים שבהם נערכים רוב המחקרים המטבוליים שבוחנים EE. מגבלה נוספת של המחקר שלנו הייתה שהעכברים היו על אותה תזונה לאורך כל המחקר, דבר שמנע מחקר של חשיבות טמפרטורת החדר לגמישות מטבולית (כפי שנמדדה על ידי שינויי RER עבור שינויים תזונתיים בהרכבי מאקרו-נוטריינטים שונים) בעכברים נקבות וזכרים שהוחזקו ב-20 מעלות צלזיוס בהשוואה לעכברים מקבילים שהוחזקו ב-30 מעלות צלזיוס.
לסיכום, המחקר שלנו מראה שכמו במחקרים אחרים, עכברים במשקל תקין במחזור 1 הם תרמו-נייטרליים מעל ל-27.5 מעלות צלזיוס החזויים. בנוסף, המחקר שלנו מראה שהשמנת יתר אינה גורם מבודד עיקרי בעכברים במשקל תקין או DIO, מה שמביא ליחסי טמפרטורה:EE דומים בעכברים במשקל DIO ובמשקל תקין. בעוד שצריכת המזון של עכברים במשקל תקין הייתה עקבית עם ה-EE וכך שמרה על משקל גוף יציב לאורך כל טווח הטמפרטורות, צריכת המזון של עכברי DIO הייתה זהה בטמפרטורות שונות, מה שמביא ליחס גבוה יותר של עכברים ב-30 מעלות צלזיוס וב-22 מעלות צלזיוס שעלו במשקל גוף רב יותר. בסך הכל, מחקרים שיטתיים הבוחנים את החשיבות הפוטנציאלית של חיים מתחת לטמפרטורות תרמו-נייטרליות מוצדקים בגלל הסבילות הירודה שנצפית לעתים קרובות בין מחקרים בעכברים למחקרים בבני אדם. לדוגמה, במחקרי השמנת יתר, הסבר חלקי לתרגום הפחות תקין בדרך כלל עשוי להיות בשל העובדה שמחקרי ירידה במשקל בעכברים מבוצעים בדרך כלל על בעלי חיים הנמצאים תחת לחץ בינוני בקור המוחזקים בטמפרטורת החדר עקב ה-EE המוגבר שלהם. ירידה מוגזמת במשקל בהשוואה למשקל הגוף הצפוי של אדם, בפרט אם מנגנון הפעולה תלוי בהגברת EE על ידי הגברת פעילות BAP, שהוא פעיל יותר ומופעל בטמפרטורת החדר מאשר ב-30 מעלות צלזיוס.
בהתאם לחוק הניסויים בבעלי חיים הדני (1987) ולמכונים הלאומיים לבריאות (פרסום מס' 85-23) ולאמנה האירופית להגנה על בעלי חוליות המשמשים למטרות ניסוי ומדעיות אחרות (מועצת אירופה מס' 123, שטרסבורג, 1985).
עכברי C57BL/6J זכרים בני עשרים שבועות התקבלו מ-Janvier Saint Berthevin Cedex, צרפת, וקיבלו מזון סטנדרטי (Altromin 1324) ומים (~22°C) כרצונם לאחר מחזור אור:חושך של 12:12 שעות בטמפרטורת החדר. עכברי DIO זכרים (20 שבועות) התקבלו מאותו ספק וקיבלו גישה כרצונם לדיאטה עשירה ב-45% שומן (מס' קטלוגי D12451, Research Diet Inc., ניו ג'רזי, ארה"ב) ומים בתנאי גידול. העכברים הותאמו לסביבה שבוע לפני תחילת המחקר. יומיים לפני ההעברה למערכת הקלורימטריה העקיפה, העכברים נשקלו, עברו סריקת MRI (EchoMRITM, טקסס, ארה"ב) וחולקו לארבע קבוצות התואמות למשקל גוף, שומן ומשקל גוף תקין.
תרשים גרפי של מבנה המחקר מוצג באיור 8. עכברים הועברו למערכת קלורימטריה עקיפה סגורה ובקרה-טמפרטורה בחברת Sable Systems Internationals (נבדה, ארה"ב), שכללה מדידת איכות מזון ומים ומסגרת Promethion BZ1 שתיעדה רמות פעילות על ידי מדידת מעברי קרן. XYZ. עכברים (n = 8) שוכנו בנפרד בטמפרטורה של 22, 25, 27.5 או 30 מעלות צלזיוס, תוך שימוש במצעים אך ללא מחסה וחומרי קינון, במחזור אור:חושך של 12:12 שעות (אור: 06:00-18:00). 2500 מ"ל/דקה. העכברים עברו אקלום במשך 7 ימים לפני הרישום. הרישומים נאספו ארבעה ימים ברציפות. לאחר מכן, העכברים הוחזקו בטמפרטורות המתאימות של 25, 27.5 ו-30 מעלות צלזיוס למשך 12 ימים נוספים, ולאחר מכן נוספו תרכיזי התאים כמתואר להלן. בינתיים, קבוצות של עכברים שהוחזקו בטמפרטורה של 22 מעלות צלזיוס הוחזקו בטמפרטורה זו במשך יומיים נוספים (כדי לאסוף נתוני בסיס חדשים), ולאחר מכן הטמפרטורה הועלתה במרווחים של 2 מעלות צלזיוס כל יומיים בתחילת שלב האור (06:00) עד להגעה ל-30 מעלות צלזיוס. לאחר מכן, הטמפרטורה הורדה ל-22 מעלות צלזיוס ונתונים נאספו במשך יומיים נוספים. לאחר יומיים נוספים של רישום ב-22 מעלות צלזיוס, נוספו עורות לכל התאים בכל הטמפרטורות, ואיסוף הנתונים החל ביום השני (יום 17) ולמשך שלושה ימים. לאחר מכן (יום 20), נוסף חומר קינון (8-10 גרם) לכל התאים בתחילת מחזור האור (06:00) ונתונים נאספו במשך שלושה ימים נוספים. לפיכך, בסוף המחקר, עכברים שהוחזקו בטמפרטורה של 22 מעלות צלזיוס הוחזקו בטמפרטורה זו במשך 21/33 ימים וב-22 מעלות צלזיוס במשך 8 הימים האחרונים, בעוד שעכברים בטמפרטורות אחרות הוחזקו בטמפרטורה זו במשך 33 ימים. עכברים ניזונו במהלך תקופת המחקר.
עכברים במשקל תקין ועכברים במשקל תקין (DIO) עקבו אחר אותם הליכי מחקר. ביום 9-, העכברים נשקלו, עברו סריקת MRI וחולקו לקבוצות דומות במשקל גוף ובהרכב גוף. ביום 7-, העכברים הועברו למערכת קלורימטריה עקיפה סגורה ומבוקרת טמפרטורה מתוצרת SABLE Systems International (נבדה, ארה"ב). העכברים שוכנו בנפרד עם מצעים אך ללא חומרי קינון או מחסה. הטמפרטורה נקבעה ל-22, 25, 27.5 או 30 מעלות צלזיוס. לאחר שבוע של התאקלמות (ימים 7- עד 0, בעלי החיים לא הופרעו), נאספו נתונים בארבעה ימים רצופים (ימים 0-4, נתונים מוצגים באיורים 1, 2, 5). לאחר מכן, עכברים שהוחזקו בטמפרטורה של 25, 27.5 ו-30 מעלות צלזיוס הוחזקו בתנאים קבועים עד היום ה-17. במקביל, הטמפרטורה בקבוצת 22°C הועלתה במרווחים של 2°C כל יומיים על ידי התאמת מחזור הטמפרטורה (06:00) בתחילת החשיפה לאור (הנתונים מוצגים באיור 1). ביום 15, הטמפרטורה ירדה ל-22°C ונאספו נתונים מיומיים כדי לספק נתוני בסיס לטיפולים הבאים. עורות נוספו לכל העכברים ביום 17, וחומר קינון נוסף ביום 20 (איור 5). ביום ה-23, העכברים נשקלו ועברו סריקת MRI, ולאחר מכן נותרו לבדם למשך 24 שעות. ביום 24, העכברים צמו מתחילת האור-פרקיד (06:00) וקיבלו OGTT (2 גרם/ק"ג) בשעה 12:00 (6-7 שעות של צום). לאחר מכן, העכברים הוחזרו לתנאי SABLE המתאימים להם והורדמו ביום השני (יום 25).
עכברי DIO (n = 8) עקבו אחר אותו פרוטוקול כמו עכברים במשקל תקין (כמתואר לעיל ובאיור 8). עכברים שמרו על 45% HFD לאורך כל ניסוי הוצאת האנרגיה.
VO2 ו-VCO2, כמו גם לחץ אדי מים, נרשמו בתדר של 1 הרץ עם קבוע זמן תא של 2.5 דקות. צריכת מזון ומים נאספה על ידי רישום רציף (1 הרץ) של משקל דליי המזון והמים. צג האיכות בו נעשה שימוש דיווח על רזולוציה של 0.002 גרם. רמות הפעילות נרשמו באמצעות צג מערך קרן XYZ תלת-ממדי, הנתונים נאספו ברזולוציה פנימית של 240 הרץ ודווחו כל שנייה כדי לכמת את המרחק הכולל שעברו (מ') עם רזולוציה מרחבית אפקטיבית של 0.25 ס"מ. הנתונים עובדו באמצעות Sable Systems Macro Interpreter גרסה 2.41, חישב EE ו-RER וסנן חריגים (למשל, אירועי ארוחות שגויות). מפרש המאקרו מוגדר להפיק נתונים עבור כל הפרמטרים כל חמש דקות.
בנוסף לוויסות EE, טמפרטורת הסביבה עשויה גם לווסת היבטים אחרים של חילוף החומרים, כולל מטבוליזם של גלוקוז לאחר ארוחה, על ידי ויסות הפרשת הורמונים המבצעים מטבוליזם של גלוקוז. כדי לבחון השערה זו, השלמנו לבסוף מחקר טמפרטורת גוף על ידי גירוי עכברים במשקל תקין עם עומס גלוקוז פומי של DIO (2 גרם/ק"ג). השיטות מתוארות בפירוט בחומרים נוספים.
בסוף המחקר (יום 25), עכברים עברו צום במשך 2-3 שעות (החל מהשעה 06:00), הורדמו באמצעות איזופלוראן, ודיממו לחלוטין באמצעות ורידי רטרו-אורביטלי. כימות ליפידים בפלזמה, הורמונים וליפידים בכבד מתואר בחומרים משלימים.
כדי לבדוק האם טמפרטורת הקליפה גורמת לשינויים פנימיים ברקמת השומן המשפיעים על הליפוליזה, נכרתה רקמת שומן מפשעתית ואפידידימלית ישירות מעכברים לאחר השלב האחרון של הדימום. הרקמות עובדו באמצעות מבחן הליפוליזה ex vivo שפותח לאחרונה, המתואר בשיטות המשלימות.
רקמת שומן חומה (BAT) נאספה ביום סיום המחקר ועובדה כמתואר בשיטות המשלימות.
הנתונים מוצגים כממוצע ± SEM. גרפים נוצרו ב-GraphPad Prism 9 (לה חויה, קליפורניה) והגרפיקה נערכה ב-Adobe Illustrator (Adobe Systems Incorporated, סן חוזה, קליפורניה). משמעות סטטיסטית הוערכה ב-GraphPad Prism ונבדקה באמצעות מבחן t מזווג, מדידות חוזרות חד-כיווניות/דו-כיווניות ANOVA ולאחר מכן מבחן השוואות מרובות של Tukey, או ANOVA חד-כיווניות לא מזווג ולאחר מכן מבחן השוואות מרובות של Tukey לפי הצורך. התפלגות גאוס של הנתונים אומתה על ידי מבחן הנורמליות D'Agostino-Pearson לפני הבדיקה. גודל המדגם מצוין בסעיף המתאים בסעיף "תוצאות", וכן במקרא. חזרה מוגדרת ככל מדידה שנעשתה על אותו בעל חיים (in vivo או על דגימת רקמה). מבחינת שחזור נתונים, קשר בין הוצאת אנרגיה לטמפרטורת המקרה הודגם בארבעה מחקרים בלתי תלויים תוך שימוש בעכברים שונים עם תכנון מחקר דומה.
פרוטוקולים ניסויים מפורטים, חומרים ונתונים גולמיים זמינים לפי בקשה סבירה מהמחבר הראשי, רונה א. קוהרה. מחקר זה לא יצר ריאגנטים ייחודיים חדשים, שורות תאים/בעלי חיים טרנסגניים או נתוני ריצוף.
למידע נוסף על תכנון המחקר, עיינו בתקציר של דוח המחקר של Nature המקושר למאמר זה.
כל הנתונים יוצרים גרף. 1-7 הופקדו במאגר מסד הנתונים Science, מספר גישה: 1253.11.sciencedb.02284 או https://doi.org/10.57760/sciencedb.02284. הנתונים המוצגים ב-ESM עשויים להישלח לרונה אי. קוהרה לאחר בדיקה סבירה.
נילסון, ק., ראון, ק., יאן, פ.פ., לארסן, מ.ו. וטאנג-כריסטנסן, מ. חיות מעבדה כמודלים חלופיים להשמנת יתר בבני אדם. נילסון, ק., ראון, ק., יאן, פ.פ., לארסן, מ.ו. וטאנג-כריסטנסן, מ. חיות מעבדה כמודלים חלופיים להשמנת יתר בבני אדם.Nilsson K, Raun K, Yang FF, Larsen MO. and Tang-Christensen M. חיות מעבדה כמודלים פונדקאיים להשמנת יתר בבני אדם. Nilsson, C., Raun, K., Yan, FF, Larsen, MO & Tang-Christensen, M. 实验动物作为人类肥胖的替代模型。 נילסון, ק., ראון, ק., יאן, פ.פ., לארסן, מ.ו. וטאנג-כריסטנסן, מ. חיות ניסוי כמודל חלופי לבני אדם.Nilsson K, Raun K, Yang FF, Larsen MO. and Tang-Christensen M. חיות מעבדה כמודלים פונדקאיים להשמנת יתר בבני אדם.Acta Pharmacology. פשע 33, 173–181 (2012).
גילפין, ד.א. חישוב קבוע ה-Mie החדש וקביעה ניסיונית של גודל הכוויה. ברנס 22, 607–611 (1996).
גורדון, SJ מערכת התרמו-רגולטורית של עכבר: השלכותיה על העברת נתונים ביו-רפואיים לבני אדם. פיזיולוגיה. התנהגות. 179, 55-66 (2017).
Fischer, AW, Csikasz, RI, von Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. אין השפעה מבודדת של השמנת יתר. Fischer, AW, Csikasz, RI, von Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. אין השפעה מבודדת של השמנת יתר.Fischer AW, Chikash RI, von Essen G., Cannon B., and Nedergaard J. אין אפקט בידוד של השמנת יתר. Fischer, AW, Csikasz, RI, פון Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. 肥胖没有绝缘作用. פישר, AW, Csikasz, RI, פון Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. Fischer, AW, Csikasz, RI, von Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. Ожирение не имеет изолирующего эффекта. Fischer, AW, Csikasz, RI, von Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. להשמנה אין השפעה מבודדת.כן. J. פיזיולוגיה. אנדוקרינית. מטבוליזם. 311, E202–E213 (2016).
לי, פ. ואחרים. רקמת שומן חומה המותאמת לטמפרטורה מווסתת את הרגישות לאינסולין. סוכרת 63, 3686–3698 (2014).
Nakhon, KJ et al. טמפרטורה קריטית נמוכה יותר ותרמוגנזה מושרה מקור היו ביחס הפוך למשקל הגוף ולקצב חילוף החומרים הבסיסי אצל אנשים רזים ובעלי עודף משקל. J. Warmly. biology. 69, 238–248 (2017).
Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. טמפרטורות דיור אופטימליות לעכברים לחיקוי הסביבה התרמית של בני אדם: מחקר ניסיוני. Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. טמפרטורות דיור אופטימליות לעכברים לחיקוי הסביבה התרמית של בני אדם: מחקר ניסיוני.Fischer, AW, Cannon, B., and Nedergaard, J. טמפרטורות בית אופטימליות עבור עכברים לחיקוי הסביבה התרמית האנושית: מחקר ניסיוני. Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. 小鼠模拟人类热环境的最佳住房温度：一项实验研究。 Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J.פישר AW, קנון B., ונדרגארד J. טמפרטורת דיור אופטימלית לעכברים המדמים סביבה תרמית אנושית: מחקר ניסיוני.מור. מטבוליזם. 7, 161–170 (2018).
Keijer, J., Li, M. & Speakman, JR מהי טמפרטורת הדיור הטובה ביותר כדי לתרגם ניסויים בעכברים לבני אדם? Keijer, J., Li, M. & Speakman, JR מהי טמפרטורת הדיור הטובה ביותר כדי לתרגם ניסויים בעכברים לבני אדם?קיייר ג'יי, לי מ' וספיקמן ג'יי. מהי טמפרטורת החדר הטובה ביותר להעברת ניסויי עכבר לבני אדם? Keijer, J., Li, M. & Speakman, JR 将小鼠实验转化为人类的最佳外壳温度是多少? Keijer, J., Li, M. & Speakman, JRקיייר ג'יי, לי מ' וספיקמן ג'יי. מהי טמפרטורת הקליפה האופטימלית להעברת ניסויי עכבר לבני אדם?מור. מטבוליזם. 25, 168–176 (2019).
Seeley, RJ & MacDougald, OA עכברים כמודלים ניסיוניים לפיזיולוגיה אנושית: כאשר מספר מעלות בטמפרטורת הדיור חשובות. Seeley, RJ & MacDougald, OA עכברים כמודלים ניסיוניים לפיזיולוגיה אנושית: כאשר מספר מעלות בטמפרטורת הדיור חשובות. Seeley, RJ ו-MacDougald, OA. Seeley, RJ & MacDougald, OA עכברים כמודלים ניסיוניים לפיזיולוגיה אנושית: כאשר כמה מעלות בדירה עושות את ההבדל. Seeley, RJ & MacDougald, OA 小鼠作为人类生理学的实验模型：当几度的住房温度很重要时。 סילי, אר ג'יי ומקדוגלד, אוהיו Мыши Seeley, RJ & MacDougald, OA. значение. Seeley, RJ & MacDougald, עכברי OA כמודל ניסיוני של פיזיולוגיה אנושית: כאשר כמה מעלות של טמפרטורת החדר חשובות.מטבוליזם לאומי. 3, 443–445 (2021).
Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. התשובה לשאלה "מהי טמפרטורת הדיור הטובה ביותר לתרגום ניסויי עכבר לבני אדם?" Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. התשובה לשאלה "מהי טמפרטורת הדיור הטובה ביותר לתרגום ניסויי עכבר לבני אדם?" Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. תשובה לשאלה "מהי טמפרטורת החדר הטובה ביותר להעברת ניסויי עכבר לבני אדם?" פישר, AW, Cannon, B. & Nedergaard, ג'יי. Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J.פישר AW, קנון B., ונדרגארד J. תשובות לשאלה "מהי טמפרטורת הקליפה האופטימלית להעברת ניסויי עכבר לבני אדם?"כן: תרמו-נייטרלי. מור. מטבוליזם. 26, 1-3 (2019).